Ultra Nuclease GMP-minőségű
Katalógusszám: HC2016A
Az UltraNuclease GMP-minőséget Escherichia coliban (E. coli) expresszálják és tisztítják GMP-környezetben génmanipulált és előállított módon.Csökkentheti a sejtfelülúszó és a sejtlizátum viszkozitását a tudományos kutatás során, növelheti a fehérjetisztítás hatékonyságát és fokozhatja a fehérje funkcionális kutatását.A termék a gazdaszervezet nukleinsavmaradékait is pg-minőségűre csökkentheti, javítva a biológiai termékek teljesítményét és biztonságát olyan alkalmazásokban, mint a vírustisztítás, a vakcinagyártás és a fehérje/poliszacharid gyógyszergyártás.Emellett a termék a humán perifériás vér mononukleáris sejtek (PBMC) csomósodásának megelőzésére is alkalmazható sejtterápiában és vakcinafejlesztésben.
Az UltraNuclease sterilezett reagens formájában kapható, amelyet pufferben (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin) eluálunk, színtelen, átlátszó folyadék megjelenésével.Ezt a terméket a GMP eljárás követelményei szerint állítják elő, és folyékony formában szállítják.
Alkatrészek
UltraNuclease GMP-minőségű (250 U/μL)
Tárolási feltételek
A terméket szárazjéggel szállítjuk, és -25℃~-15°C-on két évig tárolható.
Ha a terméket felbontották és több mint egy hétig 4°C-on tárolták, javasoljuk a szűrésta termék a mikrobiális szennyeződés megelőzésére.
Műszaki adatok
| Expression Host | Rekombináns E. coli UltraNuclease génnel |
| Molekuláris tömeg | 26,5 kDa |
| elektromos pont | 6.85 |
| Tisztaság | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Tárolópuffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin |
|
Mértékegység meghatározása | Az egy aktivitási egység (U) meghatározása a használt enzim mennyiségemódosítsa a ΔA260 abszorpciós értékét 1,0-val 30 perc alatt egy 2,625 ml-esreakciórendszer 37 ℃-on, pH 8,0 (egyenértékű a teljes emésztéssel37 μg lazac spermium DNS oligonukleotidokba). |
Utasítás
1. Minta Gyűjtemény
Tapadó sejtek: távolítsuk el a táptalajt, mossuk a sejteket PBS-sel, és távolítsuk el a felülúszót.
Szuszpenziós sejtek: gyűjtsük össze a sejteket centrifugálással, mossuk a sejteket PBS-sel, centrifugáljuk 6000 °C-onford./perc 10 percig, gyűjtsük össze a pelletet.
Escherichia coli: gyűjtsük össze a baktériumokat centrifugálással, mossuk egyszer PBS-sel, centrifugáljuk 8000-enford./perc 5 percig, és gyűjtsük össze a pelletet.
2. Mintakezelés
Kezelje az összegyűjtött sejtpelleteket lízispufferrel tömeg(g) térfogat(mL)1:(10-20) arányban, vagy mechanikai vagy kémiai módszerekkel jégen vagy szobahőmérsékleten (1 g sejtpellet kb.
109 cella).
3. Enzimkezelés
Adjunk hozzá 1-5 mM MgCl-t a reakciórendszerhez, és állítsuk be a pH-t 8-9-re.
Adjon hozzá UltraNuclease-t 250 egység arányban 1 g sejtpellet megemésztéséhez, inkubálja 37 °C-on több mint 30 percig.Kérjük, olvassa el a „Javasolt reakcióidő” űrlapot a kiválasztásáhoza kezelés időtartama.
4. Felülúszó Gyűjtemény
Centrifugálja 12 000 fordulat/perc sebességgel 30 percig, és gyűjtse össze a felülúszót.
Megjegyzés: Ha az oldat savas vagy lúgos, vagy nagy koncentrációban tartalmaz sót, tisztítószert, illdenaturáló szerek, kérjük, növelje az enzim adagját, vagy ennek megfelelően hosszabbítsa meg a kezelési időt.
Javasolt reakciókörülményekons
| Paraméter | Optimális Állapot | Hatékony kondicionáló |
| Mg²+koncentráció | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Hőfok | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT koncentráció | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol koncentráció | 0-100 mM | >0 mM |
| Egyértékű kationkoncentráció | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Foszfát lon Koncentráció | 0-10 mM | 0-100 mM |
Ajánlott Reakció Idő (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease mennyiség (végső koncentráció) | Reakció idő |
| 0,25 U/ml | >10 óra |
| 2,5 U/ml | > 4 óra |
| 25 U/ml | 30 perc |
Megjegyzések:
Kérjük, hogy egészsége és biztonsága érdekében viselje a szükséges PPE-t, például laborköpenyt és kesztyűt!
