Rnase A
A ribonukleáz A(RNázA) egyszálú polipeptid, amely 4 diszulfidkötést tartalmaz, molekulatömege körülbelül 13,7 kDa.Az RNáz A egy endoribonukleáz, amely specifikusan lebontja az egyszálú RNS-t a C és U csoportokon.Pontosabban, a hasítás felismeri a foszfodiészter kötést, amelyet egy nukleotid 5'-ribózja és a szomszédos pirimidin nukleotid 3'-ribózján lévő foszfátcsoport képez, így a 2,3'-ciklusos foszfátok a megfelelő 3-as foszfáttá hidrolizálódnak. nukleozid-foszfátok (pl. a pG-pG-pC-pA-pG-t az RNáz A hasítja, így pG-pG-pCp és A-PG jön létre).Az RNáz A a legaktívabb az egyszálú RNS hasításában.Az ajánlott munkakoncentráció 1-100 μ G/mL, kompatibilis a különböző reakciórendszerekkel.Alacsony sókoncentráció (0-100 mM NaCl) használható egyszálú RNS, kétszálú RNS és RNS-DNS hibridizációval létrejött RNS láncok vágására.
Azonban magas sókoncentrációnál (≥0,3 M) az RNáz A csak specifikusan hasítja az egyszálú RNS-t.
Az RNáz A-t leggyakrabban az RNS eltávolítására használják a plazmid DNS vagy genomiális DNS előállítása során.Az, hogy a DNáz aktív-e az előállítási folyamat során, könnyen befolyásolhatja a reakciót.A DNáz aktivitás inaktiválására a vízfürdőben való forralás hagyományos módszere használható.Ez a termék nem tartalmaz DNázt és proteázt, és használat előtt nem igényel hőkezelést.Ezenkívül ez a termék molekuláris biológiai kísérletekben is használható, például RNáz védelmi elemzésben és RNS szekvencia elemzésben.
Tárolási feltételek
A terméket -25 ℃ ~ - 15 ℃ között kell tárolni 2 évig.
Műszaki adatok
| Kinézet | Por |
| Mennyiség | 100 mg / 1 g |
| Terméktípus | RNáz A |
Utasítás
Ez az egyik általános módszer az RNáz A tárolóoldat elkészítésére.El is készíthetőmás módszerekkel a laboratóriumi vagy referencia irodalom hagyományos módszerei szerint (plközvetlenül feloldódik 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 vagy Tris-NaCl oldatban)
1. 10 mg/ml RNáz A tárolóoldat elkészítéséhez használjon 10 mM nátrium-acetátot (pH 5,2).
2. Melegítés 100 ℃-on 15 percig.
3. Hűtsük le szobahőmérsékletre, adjunk hozzá 1/10 térfogat 1 M Tris-HCl-t (pH 7,4), állítsuk be a pH-t 7,4-re.például adjunk hozzá 500 ml 10 mg/ml RNáz tárolóoldatot, 1 M Tris-HCl, pH 7,4).
4. -20 ℃-ra csomagolva fagyasztott tároláshoz, amely akár 2 évig is stabil.
[Megjegyzések]:
Amikor az RNázA oldatot semleges körülmények között forraljuk, RNáz csapadék képződik;Alacsonyabb pH-n forraljuk, és ha van csapadék, akkor ez megfigyelhető, amit fehérje szennyeződések jelenléte okozhat.Ha forralás után üledéket találunk, a szennyeződéseket nagy sebességű centrifugálással (13000 ford./perc) eltávolíthatjuk, majd fagyasztva tárolhatjuk.
Megjegyzések
Kérjük, viselje a szükséges PPE-t, például laborköpenyt és kesztyűt egészsége és biztonsága érdekében.
