Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Leírás
Katalógusszám: HCR5141A
A Multiplex One Step RT-qPCR Premix egy multiplex kvantitatív PCR készlet, amely templátként RNS-en alapul.A kísérletben a reverz transzkripciót és a kvantitatív PCR-t ugyanabban a reakciócsőben végezzük, ezzel leegyszerűsítve a kísérleti műveletet és csökkentve a szennyeződés kockázatát.A puffer és az enzimkeverék egyedülálló kialakítása egylépcsős liofilizált rendszerben használható.A készlet hőálló reverz transzkriptázt használ az első szál cDNS hatékony szintéziséhez, a hotstart Taq DNS-polimeráz segítségével a kvantitatív amplifikációhoz.Optimalizált reakciópuffert, enzimkeveréket stb. tartalmaz, és olyan tényezőket adtunk hozzá, amelyek hatékonyan gátolják a nem specifikus PCR amplifikációt és fokozzák a többszörös qPCR reakciók amplifikációs hatékonyságát, lehetővé téve a többszörös fluoreszcencia kvantitatív amplifikációt, miközben biztosítják a primerek amplifikációs hatékonyságát.
Alkatrészek
| Név |
| 1. Lyo-puffer |
| 2. Lyo-enzim keverék |
| 3. Lyo védő |
Szállítási feltételion
V: Lyo-puffer és védő: -25 ~ -15 ℃, eltarthatósága 1 év.
B: Lyo-enzim keverék, 2-8 ℃, eltarthatósága 6 hónap.
Használati utasítás
1. Reakciórendszer (Vegyünk például 25 μL-t)
| Alkatrészek | Térfogat (μL) | Végső koncentráció |
| Lyo-puffer | 6 | 1* |
| Lyo-enzim keverék | 1 | - |
| Lyo-védő | 8 | - |
| Alapozó keverék (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Szonda keverék (10 μM) | 0.5 | 0,05-0,5 uM |
| RNS sablon | 5 | - |
| DEPC H2O | 25-ig | - |
2. Optimalizált kerékpározási protokoll
1) Szabványos kerékpározási protokoll
| Reakciós szakasz | Hőfok | Idő | Ciklus | |
| 1 | Fordított átírás | 50°Ca | 10 perc | 1 |
| 2 | Kezdeti denaturáció | 95°C | 5 perc | 1 |
| 3 | Amplifikációs reakció | 95°C | 15 mp | 45 ciklus |
| 60°Cb | 30 mpc |
2) Gyors kerékpározási protokoll
|
| Reakciós szakasz | Hőfok | Idő | Ciklus |
| 1 | Fordított átírás | 50°Ca | 2 perc | 1 |
| 2 | Kezdeti denaturáció | 95°C | 2 mp | 1 |
| 3 | Amplifikációs reakció | 95°C | 1 perc |
45 ciklus |
| 60°Cb | 13 mpc |
Jegyzet:
a) Fordított átírása: A hőmérséklet 42°C vagy 50°C között választható 10-15 percig.
b) Amplifikációs reakció: A hőmérsékletet a tervezett alapozók Tm értékének megfelelően állítjuk be.
c)Fluoreszcencia jel beszerzés: Kérjük, állítsa be a kísérleti eljárást a követelményei szerintműszer kézikönyv.
Műszaki információk/specifikációk
| Hot Start | Beépített melegindítás |
| Észlelési módszer | Primer-szonda érzékelés |
| PCR módszer | Egylépéses RT-qPCR |
| A minta típusa | RNS |
Megjegyzések
1. Ez a termék kizárólag kutatási célra szolgál.
2. Kérjük, viselje a szükséges PPE-t, például laborköpenyt és kesztyűt egészsége és biztonsága érdekében!
