Multiplex qPCR Probe Premix
Katalógusszám: HCB5051A
A TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) egy előmegoldás a 2-szeres valós idejű kvantitatív PCR amplifikációhoz, amelyet nagy érzékenység és specifitás jellemez, amely kék színű, és mintaadás hatása van.Ez a termék egy 2× Mix előre kevert reagens, amely akár négy fluoreszcens kvantitatív PCR reakciót tesz lehetővé egyetlen reakcióüregben.Ez a termék tartalmazza a genetikailag módosított antitest módszert a hot-start Taq enzim ellen, nagymértékben javítva az amplifikációs érzékenységet és specificitást.Ugyanakkor ez a termék mélyen optimalizálta a többreakciós puffert, ami javíthatja a reakció amplifikációs hatékonyságát és elősegítheti az alacsony koncentrációjú sablonok hatékony erősítését.Ez a termék genotipizálásra és multiplex kvantitatív elemzésre használható.
Leírás
| Hot Start | Beépített melegindítás |
| Észlelési módszer | Primer-szonda érzékelés |
| PCR módszer | qPCR |
| Polimeráz | Taq DNS polimeráz |
| A minta típusa | DNS |
Tárolási feltételek
A terméket szárazjéggel szállítjuk, és -25 ~ -15 ℃ között 2 évig tárolható.
Utasítás
1. ReakcióRendszer
| Alkatrészek | Térfogat (μL) | Végső koncentráció |
| 2× TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Primer keverék (10 μmol/L) a | × | 0,1-0,5 μmol/L |
| Szonda keverék (10 μmol/L)b | × | 50-250 nmol/l |
| Rox referenciafesték | 0.5 | 1× |
| Templát DNS/cDNS | 1-10 | - |
| ddH2O | 25-ig | - |
Megjegyzések:Használat előtt alaposan keverje össze, hogy elkerülje az erőteljes rázásból származó túlzott buborékokat.
a.Primer koncentráció: A Primer Mix több pár primert tartalmaz, általában mindegyik primer végső koncentrációja 0,2 μmol/L, és szükség szerint 0,1 és 0,5 μmol/L között is beállítható.
b.Szonda koncentrációja: A Probe Mix több szondát tartalmaz különböző fluoreszcens jelekkel, és mindegyik szonda koncentrációja 50 és 250 nmol/L között állítható az adott helyzetnek megfelelően.
1.Rox festék referencia: Real Time PCR amplifikációs készülékeken, például Applied Biosystems-en használják a lyukak között generált fluoreszcencia jel hibájának kijavítására;ez a termék nem tartalmaz Rox festék referenciát.Cas#10200 ajánlott, ha szükséges.
2.Sablonhígítás: A qPCR nagyon érzékeny, ezért használathoz ajánlott a sablon hígítása.Ha a templát cDNS törzsoldat, a templát térfogata nem haladhatja meg a teljes térfogat 1/10-ét.
3.Reakciórendszer: 25μL, 30μL vagy 50 μL javasolt a célgénamplifikáció hatékonyságának és ismételhetőségének biztosítására.
4.A rendszer előkészítése: Kérjük, készüljön fel a szupertiszta padon, és használja a hegyeket és a reakciócsöveket nukleázmaradvány nélkül;a hegyek használata szűrőpatronokkal javasolt.Kerülje a keresztszennyeződést és az aeroszolos szennyeződést.
2.Reakció program
| Ciklus lépés | Temp. | Idő | Ciklusok |
| Kezdeti-denaturáció | 95 ℃ | 5 perc | 1 |
| Denaturáció | 95 ℃ | 15 mp | 45 |
| Lágyítás/kiterjesztés | 60 ℃ | 30 mp |
Megjegyzések:
1.Lágyítás/hosszabbítás: A hőmérséklet és az idő megfelelően beállítható a tervezett alapozó Tm értékének megfelelően.
2.Fluoreszcencia jel gyűjtése: A különböző qPCR detektáló eszközökhöz szükséges fluoreszcencia jel gyűjtési ideje eltérő, kérjük, állítsa be a minimális időkorlát szerint.Számos gyakori műszer ideje a következőképpen van beállítva:
20 mp: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 mp: Applied Biosystems 7300
32 mp: Applied Biosystems 7500
Megjegyzések
Kérjük, hogy egészsége és biztonsága érdekében viselje a szükséges PPE-t, például laborköpenyt és kesztyűt!
