Vírus DNS/RNS extrakciós készlet
Ez a készlet alkalmas nagy tisztaságú vírus DNS/RNS gyors kivonására olyan mintákból, mint az orrgarat tamponok, környezeti tamponok, sejtkultúra felülúszók és szövethomogenizátum felülúszók.A készlet szilícium-dioxid membrán tisztítási technológián alapul, amely kiküszöböli a fenol/kloroform szerves oldószerek vagy az időigényes alkoholos kicsapás szükségességét a vírus DNS/RNS kiváló minőségű kinyeréséhez.A kapott nukleinsavak szennyeződésektől mentesek, és készen állnak az olyan downstream kísérletekben való felhasználásra, mint a reverz transzkripció, PCR, RT-PCR, valós idejű PCR, következő generációs szekvenálás (NGS) és Northern blot.
Tárolási feltételek
15 ~ 25 ℃ között tárolandó, szobahőmérsékleten szállítandó
Alkatrészek
| Alkatrészek | 100RXNS |
| VL puffer | 50 ml |
| Puffer RW | 120 ml |
| RNáz-mentes ddH2O | 6 ml |
| FastPure RNS oszlopok | 100 |
| Gyűjtőcsövek (2 ml) | 100 |
| RNáz-mentes gyűjtőcsövek (1,5 ml) | 100 |
VL puffer:Biztosítson környezetet a lízishez és a kötéshez.
RW puffer:Távolítsa el a maradék fehérjéket és egyéb szennyeződéseket.
RNáz-mentes ddH2O:Eluáljuk a DNS/RNS-t a membránról a spin oszlopban.
FastPure RNS oszlopok:Konkrétan adszorbeálja a DNS-t/RNS-t.
Gyűjtőcsövek 2 ml:Gyűjtsük össze a szűrletet.
RNáz-mentes gyűjtőcsövek 1,5 ml:Gyűjtse össze a DNS-t/RNS-t.
Alkalmazások
Orrgarat-tamponok, környezeti tamponok, sejttenyészet felülúszók és szövethomogenizátum felülúszók.
Saját készítésű anyagials
RNáz-mentes pipettahegyek, 1,5 ml-es RNáz-mentes centrifugacsövek, centrifuga, vortex keverő és pipetták.
Kísérleti folyamat
Hajtsa végre az összes alábbi lépést egy biológiai biztonsági szekrényben.
1. Adjon 200 μl mintát egy RNáz-mentes centrifugacsőbe (töltse fel PBS-sel vagy 0,9% NaCl-lel, ha a minta nem elegendő), adjon hozzá 500 μl VL puffert, keverje jól 15-30 másodpercig vortexelve, és centrifugálja. rövid ideig, hogy a keverék a cső alján összegyűljön.
2. Helyezzen FastPure RNS oszlopokat 2 ml-es gyűjtőcsövekbe.Vigye át a keveréket az 1. lépésből a FastPure RNA oszlopokba, centrifugálja 12 000 fordulat/perc (13 400 × g) sebességgel 1 percig, és dobja ki a szűrletet.
3. Adjon hozzá 600 μl RW puffert a FastPure RNA oszlopokhoz, centrifugálja 12 000 fordulat/perc (13 400 × g) sebességgel 30 másodpercig, és dobja ki a szűrletet.
4. Ismételje meg a 3. lépést.
5. Centrifugálja az üres oszlopot 12 000 fordulat/perc (13 400 × g) sebességgel 2 percig.
6. Óvatosan vigye át a FastPure RNA Columns-t egy új, 1,5 ml-es RNáz-mentes gyűjtőcsövekbe (a készletben található), és adjon hozzá 30–50 μl RNáz-mentes ddH2O-t a membrán közepéhez anélkül, hogy megérintené az oszlopot.Hagyja állni szobahőmérsékleten 1 percig, és centrifugálja 12 000 fordulat/perc (13 400 × g) sebességgel 1 percig.
7. Dobja el a FastPure RNS oszlopokat.A DNS/RNS közvetlenül felhasználható a következő vizsgálatokhoz, vagy tárolható -30-15 °C-on rövid ideig, vagy -85-65 °C-on hosszabb ideig.
Megjegyzések
Kizárólag kutatási célra.Nem használható diagnosztikai eljárásokban.
1. Előzetesen állítsa be a mintákat szobahőmérsékletre.
2. A vírusok erősen fertőzőek.Kérjük, győződjön meg arról, hogy minden szükséges biztonsági óvintézkedést megtett a kísérlet előtt.
3. Kerülje a minta ismételt fagyasztását és felolvasztását, mivel ez a kivont vírus DNS/RNS lebomlásához vagy csökkenéséhez vezethet.
4. A saját készítésű berendezés RNáz-mentes pipettahegyeket, 1,5 ml-es RNáz-mentes centrifugacsöveket, centrifugát, vortex keverőt és pipettákat tartalmaz.
5. A készlet használatakor viseljen laborköpenyt, eldobható latex kesztyűt és eldobható maszkot, és használjon RNáz-mentes fogyóeszközöket az RNáz szennyeződés kockázatának minimalizálása érdekében.
6. Minden lépést szobahőmérsékleten hajtsa végre, hacsak másként nem rendelkezik.
Mechanizmus és munkafolyamat
