Mintaleadó reagens
A Sample Release Reagent molekuláris POCT diagnosztikai forgatókönyvekhez való.A két rendszer, a közvetlen amplifikációs LAMP és a közvetlen amplifikációs PCR esetében nincs szükség nukleinsav extrakcióra.A minta nyers lizátuma közvetlenül amplifikálható, a célgén pontosan kimutatható, a minta detektálási ideje tovább lerövidíthető, ami tökéletesen megfelel a molekuláris POCT alkalmazási követelményeinek.Alkalmas orr-, toroktampon és más mintatípusok készítésére.A feldolgozott minták közvetlenül felhasználhatók valós idejű fluoreszcens kvantitatív PCR vagy LAMP detektálásra, és a hagyományos extrakciós módszerekkel megegyező eredmények érhetők el bonyolult nukleinsav extrakciós műveletek nélkül.
Tárolási feltételek
Szállítás és tárolás szobahőmérsékleten.
Minőség ellenőrzés
Funkcionális kimutatás – kvantitatív qPCR: A 800 μl-es mintafelszabadító reagens rendszert felerősítették
1000 kópiával Novel Pseudovirus, egy orrtamponmintával, ami hasonló amplifikációs görbéket ésΔCt értékek ± 0,5 Ct-on belül.
Kísérleti eljárásres
1. Vegyen 800 μl mintafelszabadító reagenst, és terítse el a lízisoldatot 1,5 ml-es mintavevő csőbe
2. Vegye le a pálcikával az orr- vagy toroktörlőkendőt;Az orrtampon mintavételi eljárása: vegye a steril tampont az orrlyukakba, lassan haladjon előre kb. 1,5 cm mélységig, óvatosan forgassa négyszer az orr nyálkahártyájához több mint 15 másodpercig. , majd ismételje meg ugyanazt a műveletet a másik orrüregben is ugyanazzal a pálcikával.A torok tampon mintavételi eljárása: vegye le a steril tampont és óvatosan, gyorsan törölje le a garatmandulákat és a hátsó garatfalat 3-szor.
3.Helyezze a tampont azonnal a mintavevő csőbe.A tamponfejet forgatni kell, és legalább 30 másodpercig keverni kell a tárolóoldatban, hogy a minta teljesen eluáljon a mintavevő csőben.
4. Inkubálás szobahőmérsékleten (20-25 ℃) 1 percig, a lízispuffer elkészítése befejeződött.
5. Mind a 25μl rendszerű RT-PCR, mind az RT-LAMP kompatibilis volt 10μl mennyiségű templát hozzáadásával a detektálási kísérletekhez.
Megjegyzések
1. Az egyetlen tamponnak megfelelő direkt lizátum minimális mennyisége 400μl-re állítható, amely a vizsgálati igényeknek megfelelően állítható.
2. Ha a mintát a mintaleválasztó reagens feldolgozta, javasolt a vizsgálat következő fázisát a lehető leghamarabb elvégezni, a várakozási idő lehetőleg kevesebb, mint 1 óra.
3. A minta lizátum pH-ja savas, és a detektáló rendszernek rendelkeznie kell egy bizonyos pufferrel.Alkalmas a legtöbb PCR, RT-PCR és LAMP fluoreszcencia-detektáláshoz pH-pufferrel, de nem alkalmas LAMP-kolorimetriás detektálásra puffer nélkül.
