Alkáli foszfatáz (ALP)
Leírás
Az alkalikus foszfatáz a TAB5 gént hordozó rekombináns E. coli törzsből származik.Az enzim katalizálja a DNS és RNS foszfomonoészterek 5' és 3' végének defoszforilációját.Ezenkívül hidrolizálja a ribózt, valamint a dezoxiribonukleozid-trifoszfátokat (NTP-k és dNTP-k).A TAB5 lúgos foszfatáz 5 cm-ben kiálló, 5 cm-ben süllyesztett és tompa végekre hat.A foszfatáz számos molekuláris biológiai alkalmazásban használható, például klónozásban vagy próbavégek jelölésében a DNS vagy RNS foszforilált végeinek eltávolítására.A klónozási kísérletekben a defoszforiláció megakadályozza, hogy a linearizált plazmid DNS önligálódjon.A PCR-reakciókban lebonthatja a nem beépült dNTP-ket is, hogy templátot készítsen a DNS-szekvenáláshoz.Az enzim teljesen és visszafordíthatatlanul inaktiválódik, ha 70 °C-on 5 percig hevítjük, így szükségtelenné válik a foszfatáz eltávolítása a ligálás vagy a végjelölés előtt.
Használat
1. A fehérjékhez (antitestekhez, streptavidinhez stb.) kapcsolt alkalikus foszfatáz specifikusan képes azonosítani a célmolekulákat, és felhasználható ELISA, WB és hisztokémiai kimutatásban;
2. Az alkalikus foszfatáz felhasználható a DNS vagy RNS 5'-terminálisának defoszforizálására, hogy megakadályozzuk az önkapcsolást;
3. A fenti defoszforilált DNS vagy RNS jelölhető radioaktívan jelölt foszfátokkal (T4 polinukleotid kinázon keresztül)
Kémiai szerkezet
Leírás
Tesztelemek | Műszaki adatok |
Enzimaktivitás | 5E/μL |
Endonukleáz aktivitás | Nem található |
Exonukleáz aktivitás | Nem található |
Bejegyzési tevékenység | Nem található |
RNáz aktivitás | Nem található |
E. coli DNS | ≤1 példány/5U |
Endotoxin | LAL-teszt, ≤10EU/mg |
Tisztaság | ≥95% |
Szállítás és tárolás
Szállítás:Környező
Tárolás:2-8°C között tárolandó
Javasolt újbóli vizsgálatÉlet:2 év