Bst 2.0 DNS-polimeráz (glicerinmentes, nagy sűrűségű)
A Bst DNS polimeráz V2 a Bacillus stearothermophilus DNS polimeráz I-ből származik, amely 5′→3′ DNS polimeráz aktivitással és erős láncpótló aktivitással rendelkezik, de nincs 5′→3′ exonukleáz aktivitása.A Bst DNA Polymerase V2 ideálisan alkalmas szálkiszorításra, izoterm amplifikációra, LAMP (Loop mediated izothermal amplifikáció) és gyors szekvenálásra.Ez a Bst DNS polimeráz V2 képes gátolni a DNS polimeráz aktivitást szobahőmérsékleten, így szobahőmérsékleten működtethető és a reakciórendszer formulázható, megakadályozva a nem specifikus amplifikációt és javítva a reakció hatékonyságát. liofilizálják.Ezenkívül képes felszabadítani aktivitását emelt hőmérsékleten, így nincs szükség külön aktiválási lépésre.
Alkatrészek
| Összetevő | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNS polimeráz V2 (glicerinmentes) (32E/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 puffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Alkalmazások
1.LAMP izoterm erősítés
2.Egy DNS-szál kiszorítási reakció
3.Magas GC génszekvenálás
4.A nanogramm szintű DNS szekvenálás.
Raktározási feltételek
Szállítás 0°C alatt és -25°C--15°C között tárolandó.
Mértékegység meghatározása
Egy egység az az enzimmennyiség, amely 65 °C-on 30 perc alatt 25 nmol dNTP-t épít be savban oldhatatlan anyagba.
LÁMPA reakció
| Alkatrészek | 25 μLRendszer |
| 10×HC Bst V2 puffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP-k (egyenként 10 mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 zöld (25×)a | 1,0 μL |
| Alapozó keverékb | 6 μL |
| Bst DNS polimeráz V2 (glicerinmentes) (32 U/uL) | 0,25 μl |
| Sablon | × μL |
| ddH₂O | 25 μL-ig |
Megjegyzések:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): Kísérleti igények szerint más színezékek is használhatók helyettesítőként;
2) b.Primer keverék: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB és egyéb térfogatok összekeverésével nyerjük.
Reakció és állapot
1 × HC Bst V2 puffer, az inkubációs hőmérséklet 60°C és 65°C között van.
Hő inaktiválása
80°C, 20 perc.
