2×PCR Master Mix (festék nélkül)
A PCR Master Mix egyfajta hagyományos PCR előkevert oldat, amely használatra kész, beleértve a Taq DNS polimerázt, a dNTP mix MgCl2-t és az optimalizált puffert.A reakció során csak a primer és a templát adható hozzá az amplifikációhoz, ami nagyban leegyszerűsíti a kísérlet műveleti lépéseit.Ez a termék kiváló stabilizátorokat tartalmaz, és 4 °C-on 3 hónapig tárolható.A PCR-termék 3'-dA kiemelkedéssel rendelkezik, és könnyen klónozható T-vektorba.
Tárolási feltételek
A terméket -25 ℃ ~ -15 ℃ között kell tárolni két évig.
Műszaki adatok
Hűség (vs. Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Túlnyúlás | 3′-A |
Polimeráz | Taq DNS polimeráz |
Reakció formátum | SuperMix vagy Master Mix |
Reakciósebesség | Alapértelmezett |
Terméktípus | PCR Master Mix (2×) |
Utasítás
1.Reakciórendszer
Alkatrészek | Méret (μL) |
Sablon DNS | Alkalmas |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | 50-re |
2.Erősítési Protokoll
Ciklus lépései | Hőmérséklet (°C) | Idő | Ciklusok |
Elődenaturáció | 94 ℃ | 5 perc | 1 |
Denaturáció | 94 ℃ | 30 mp | 35 |
Lágyítás | 50-60 ℃ | 30 mp | |
Kiterjesztés | 72 ℃ | 30-60 mp/kb | |
Végső kiterjesztés | 72 ℃ | 10 perc | 1 |
Megjegyzések:
1) Templáthasználat: 50-200 ng genomiális DNS;0,1-10 ng plazmid DNS.
2) Mg2+koncentráció: Ez a termék 3 mM MgCl2-t tartalmaz, amely alkalmas a legtöbb PCR reakcióhoz.
3) Lágyítási hőmérséklet: Lásd az alapozók elméleti Tm értékét.Az izzítási hőmérséklet 2-5 ℃-kal alacsonyabbra állítható, mint az alapozó elméleti értéke.
4) Meghosszabbítási idő: Molekuláris azonosításhoz 30 mp/kb ajánlott.A génklónozáshoz 60mp/kb ajánlott.
Megjegyzések
1.Biztonsága és egészsége érdekében, kérjük, viseljen laborköpenyt és eldobható kesztyűt.
2.Csak kutatási célra!